Induro™ 反转录酶 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

Induro 反转录酶是由 II 型内含子编码的反转录酶，在 RNA 反转录合成 cDNA 过程中，展示出更强持续合成能力、热稳定性，以及抑制剂耐受能力。特别适用于长转录本、复杂二级结构，以及含有抑制成分的 RNA 样品反转录合成 cDNA。Induro 反转录酶提升了长转录本的 5′ 端测序覆盖度，因此适用于 RNA-seq 应用，例如：RNA 直接测序、长片段 cDNA 测序。

图 1：Induro 反转录酶的持续合成能力强，能够快速高效合成 cDNA

Induro™ 反转录酶 |
Induro 反转录酶能够在 55℃ 条件下，5 分钟内合成 12 kb cDNA 全长产物。以体外转录获得的不同长度且带有 Poly (A) 尾的 RNA 作为模板 (1 kb、4 kb、8 kb 或 12 kb)，验证全长 cDNA 反转录效果。验证全长 cDNA 的合成效果。首先，合成第一链 cDNA，随后，用 NaOH 水解 RNA 链，然后，将 cDNA 产物等分，分别加入 5´ 特异性引物合成全长双链 cDNA。最后，在琼脂糖凝胶上加入等体积的双链 cDNA 产物进行检测。

图 2：Induro 反转录酶热稳定性能卓越，能够在更高反应温度下稳定合成

Induro™ 反转录酶 |
Induro 反转录酶能够在 45°C-60°C条件下，10 分钟内合成 12 kb cDNA 全长产物。以体外转录获得的不同长度且带有 Poly (A) 尾的 RNA 作为模板 (1 kb、4 kb、8 kb 或 12 kb)，验证全长 cDNA 的合成效果。首先，合成第一链 cDNA，随后，用 NaOH 水解 RNA 链，然后，将 cDNA 产物等分，分别加入 5´ 特异性引物合成全长双链 cDNA。最后，在琼脂糖凝胶上加入等体积的双链 cDNA 产物进行检测。

图 3：Induro 反转录酶合成长片段 cDNA 时，产量最高 

Induro™ 反转录酶 |
转录本长度 ≥8 kb 时，Induro 反转录酶合成的 cDNA 产量最高。以体外转录获得的不同长度且带有 Poly (A) 尾的 RNA 作为模板 (1 kb、4 kb、8 kb 或 12 kb) 。首先，合成第一链 cDNA，随后，水解 RNA 链，加入 5´ 特异性引物合成第二链 cDNA。

图 4：Induro 反转录酶能够以复杂的人 RNA 为模板，反转录合成长片段 cDNA

 Induro™ 反转录酶 |
Induro 反转录酶能够以人总 RNA 为模板，分别在 50°C、55°C 或 60°C 条件下，经 10 分钟孵育，合成 >14 kb cDNA 产物。第一链 cDNA 合成后，将产物等分，使用 LongAmp® Taq 2X 预混液 (NEB #M0287) 进行 PCR。

图 5：Induro 反转录酶耐受抑制剂的能力比 TGIRT 更强
Induro™ 反转录酶 |
与 TGIRT®-III酶 (T) 相比，Induro 反转录酶 (I) 对 RNA 生物样品中常见的抑制成分耐受力更强。在 20 μ 反转录体系中加入 1 μg 长度为 8 kb 的 RNA 体外转录产物（含 poly A）和 oligo dT23VN。所有反应组分（包含 RT 酶）在冰上混合均匀后，加入抑制剂。Induro 的反转录条件为：55°C 10 min，95°C 1 min。TGIRT 的反转录条件为：60℃ 60 min，95℃ 1 min。图中抑制剂含量为其在第一链 cDNA 合成体系中的终浓度。之后加入 5´ 特异性引物合成第二链。

产品类别:
cDNA Synthesis & Reverse Transcriptases Products

应用:
RT-PCR,
cDNA Synthesis,
Reverse Transcription (cDNA Synthesis),

RT-PCR & cDNA Synthesis

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0681S     -20    
        Induro® Reverse Transcriptase M0681SVIAL -20 1 x 0.02 ml 200,000 units/ml
        Induro® RT Reaction Buffer B0681AVIAL -20 1 x 1 ml 5 X
    • M0681L     -20    
        Induro® Reverse Transcriptase M0681LVIAL -20 1 x 0.05 ml 200,000 units/ml
        Induro® RT Reaction Buffer B0681AVIAL -20 1 x 1 ml 5 X

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    • LunaScript® 反转录预混液试剂盒（无引物）

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Induro® Reverse Transcriptase Protocol (NEB #M0681)

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What is the difference between Induro Reverse Transcriptase (NEB #M0681) and ProtoScript II Reverse Transcriptase (NEB #M0368)?
    2. How do I choose between Induro Reverse Transcriptase and the different LunaScript and ProtoScript products?
    3. What is the optimal reaction temperature for Induro Reverse Transcriptase?
    4. Is it possible to inactivate Induro Reverse Transcriptase?
    5. What is the recommended incubation time for Induro Reverse Transcriptase?
    6. What is the longest cDNA generated by Induro Reverse Transcriptase?
    7. How much Induro Reverse Transcriptase should be used in a 20 µl reaction? Can the yield be further improved by using more enzyme?
    8. What RNA samples are compatible with Induro Reverse Transcriptase?
    9. How much RNA template should I use?
    10. What primer should I use with Induro Reverse Transcriptase? Can I spike in gene-specific primers to the cDNA reaction?
    11. What applications are best for Induro Reverse Transcriptase?
    12. Can the cDNA products generated by Induro Reverse Transcriptase be used in real-time PCR analysis?
    13. What thermostable DNA polymerase can be used for PCR after cDNA synthesis?
    14. Why do I have low cDNA yields?
    15. Should I include a No-RT control reaction?
    16. How do I know whether my template RNA is of good quality?
    17. Can I store Induro Reverse Transcriptase and its reaction buffer at 4°C?
    18. Can I set up my cDNA synthesis reaction at room temperature when using Induro Reverse Transcriptase?

质控、安全 & 法规

  • 质控分析

    每一新批次的 NEB 产品都要经过质控，以满足指定的质量标准，对特定产品的质量标准和每一批次的检测数据可以通过产品说明表格、COA、产品信息卡或者产品手册进行查阅或下载。关于 NEB 产品质控的详细信息，可从此处查阅。

  • 产品说明与变更通知

    产品说明表包含产品的储存温度、有效期和规格，这些文件的命名规则如下：[货号]_[规格]_[版本]

    • M0681S_L_X_v1
    • M0681S_L_X_v2

  • CoA 文件包含单个批次产品的储存温度、有效期和质控，这些文件的命名规则如下： [货号]_[规格]_[版本]_[Lot#]

    • M0681L_v1_10163774
    • M0681S_v1_10163771
    • M0681L_v2_10181150
    • M0681S_v2_10181151
    • M0681S_v2_10193696
    • M0681L_v2_10196304
    • M0681L_v2_10203121
    • M0681L_v2_10208069
    • M0681S_v2_10207349
    • M0681S_v2_10219596
    • M0681L_v2_10219595
    • M0681L_v2_10230848
    • M0681S_v2_10230847

  • SDS

    以下 SDS 文件可以帮助您安全地使用该产品

    • Induro™ 反转录酶

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