M-MuLV 反转录酶 |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

莫洛尼氏鼠白血病病毒（M-MuLV、MMLV）反转录酶是一种 RNA 介导的 DNA 聚合酶。该酶能以 RNA（合成 cDNA 时）或单链 DNA 为模板，由引物起始合成一条互补的 DNA 链。（1-4）。M-MuLV 反转录酶无 3´ → 5´ 核酸外切酶活性。

产品来源

编码 M-MuLV 反转录酶的基因在大肠杆菌载体中表达，该载体在 N 端产生 16 个额外的氨基酸，在 C 端产生 13 个氨基酸。构建的表达载体产生了具有功能性 RNase H 结构域的全功能反转录酶蛋白。

产品类别:
RT-PCR Products,
cDNA Synthesis & Reverse Transcriptases Products

应用:
cDNA Synthesis,
Reverse Transcription (cDNA Synthesis),
RT-PCR & cDNA Synthesis,

PCR

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • M0253S     -20    
        M-MuLV Reverse Transcriptase M0253SVIAL -20 1 x 0.05 ml 200,000 units/ml
        M-MuLV Reverse Transcriptase Reaction Buffer B0253SVIAL -20 1 x 1.5 ml 10 X
    • M0253L     -20    
        M-MuLV Reverse Transcriptase M0253LVIAL -20 1 x 0.25 ml 200,000 units/ml
        M-MuLV Reverse Transcriptase Reaction Buffer B0253SVIAL -20 1 x 1.5 ml 10 X

  • 特性和用法

    单位定义

    1 单位指 37℃ 条件下，50 μl 总反应体系，含 50 mM Tris-HCI（pH 8.3）、6 mM MgCl2、10 mM 二硫苏糖醇、0.5 mM [3H]-dTTP 和 0.4 mM poly(rA).oligo(dT)12-18，以 poly(rA).oligo(dT) 作为模板引物，10 分钟内催化 1 nmol 的 dTTP 掺入酸不溶物所需的酶量。

    反应条件

    1X M-MuLV 反转录酶反应缓冲液
    Incubate at 42°C

    1X M-MuLV 反转录酶反应缓冲液
    50 mM Tris-HCl
    75 mM KCl
    3 mM MgCl2
    10 mM DTT
    (pH 8.3 @ 25°C)

    贮存溶液

    50 mM Tris-HCl
    150 mM NaCl
    1 mM DTT
    0.1 mM EDTA
    50% Glycerol
    0.1% NP-40
    pH 7.6 @ 25°C

    热失活

    65°C for 20 minutes

    分子量

    理论上的: 78000 道尔顿

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    • m0368-protoscript-ii-reverse-transcriptase

  • 参考文献

    1. Verma, I.M. (1975). J.Virol.. 15, 843-854.
    2. Gerard, G.F. and Grandgenett, D.P. (1975). J.Virol.. 15, 785-797.
    3. Roth, M.J., Tanese, N. and Goff, S.P. (1985). J. Biol.Chem.. 260, 9326-9335.
    4. Sambrook, J., Fritsch, E.F. and Maniatis, T. (1989). Molecular Cloning: A Laboratory Manual(2nd Ed.). 5.52-5.55, 8.11-8.17.

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. First Strand cDNA Synthesis (Quick Protocol) (NEB #M0253)
    2. First Strand cDNA Synthesis (Standard Protocol) (NEB #M0253)
    3. First Strand cDNA Synthesis (No-RT Negative Control Reaction) (NEB #M0253)

  • 使用指南

    • cDNA/Reverse Transcriptase Tips

工具 & 资源

  • 选择指南

    • DNA Polymerase Selection Chart

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Can M-MuLV Reverse Transcriptase be used in other NEBuffers?
    2. Does M-MuLV Reverse Transcriptase require DTT?
    3. Can the M-MuLV Reverse Transcriptase transcribe through RNA-DNA junctions?
    4. How can the length of the product generated by M-MuLV Reverse Transcriptase be increased?
    5. How can the yield be improved when using M-MuLV Reverse Transcriptase?
    6. What are some of the reasons for M-MuLV Reverse Transcriptase reaction failure?
    7. Is M-MuLV Reverse Transcriptase active at temperatures higher than 42°C?
    8. Can DNA be used as a template for M-MuLV Reverse Transcriptase?
    9. Are NEB DNA Polymerases supplied with dNTPs?