NruI |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

本酶提供高保真版 NruI-HF®(NEB #R3192)

高保真(HF)限制性内切酶在 rCutSmart 缓冲液中具有 100% 活性;统一缓冲液意味着更加直接、简化的样品处理过程。HF 内切酶还会显著降低星号活性。所有 HF 内切酶均符合省时酶(Time-Saver)标准,可在 5-15 分钟内酶切底物 DNA,也可实现过夜酶切,而且不会造成 DNA 降解。HF 限制性内切酶在改造时将性能作为重要指标,可在更宽的条件下具有完全活性,最大限度地减少非特异性酶切产物,并且为实验设计提供灵活性。

产品来源

大肠杆菌菌株,携带有克隆自红色诺卡氏菌(Nocardia rubra)(ATCC 15906)的 NruI 基因。

产品类别:
Discontinued (<3 years)

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分:

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • R0192V     -20    
        NruI R0192VVIAL -20 1 x 0.05 ml 10,000 units/ml
        NEBuffer™ r3.1 B6003SVIAL -20 1 x 1.25 ml 10 X

  • 特性和用法

    单位定义

    一个单位是指在 50 µl 的总反应体系中,37℃ 条件下,1 小时内酶切 1 µg λ DNA 所需的酶量。

    反应条件

    1X NEBuffer™ r3.1
    Incubate at 37°C

    1X NEBuffer™ r3.1
    100 mM NaCl
    50 mM Tris-HCl
    10 mM MgCl2
    100 µg/ml Recombinant Albumin
    (pH 7.9 @ 25°C)

    在不同缓冲液中的活性

    NEBuffer™ r1.1: <10%
    NEBuffer™ r2.1: 10%
    NEBuffer™ r3.1: 100%
    rCutSmart™ Buffer: 10%

    稀释兼容性

    • 稀释液 A

    贮存溶液

    10 mM Tris-HCl
    50 mM KCl
    1 mM DTT
    0.1 mM EDTA
    200 µg/ml BSA
    50% Glycerol
    pH 7.4 @ 25°C

    热失活

    甲基化敏感性

    dam 甲基化: 甲基化与酶切位点重叠阻断酶切
    dcm 甲基化: 不敏感
    CpG甲基化: 阻断酶切

  • 相关产品

    相关产品

    • dam/dcm E. coli 感受态细胞
    • t1010-monarch-plasmid-miniprep-kit
    • Monarch® DNA 胶回收试剂盒
    • Monarch® PCR & DNA 纯化试剂盒(5 μg)

  • 注意事项

    1. 对于不能热失活的酶,我们建议进行柱纯化(如 Monarch® PCR & DNA 纯化试剂盒),或琼脂糖凝胶电泳后切胶回收(建议使用 Monarch 胶回收试剂盒),或酚/氯仿抽提。
    2. dam 和 CpG 甲基化与酶切位点重叠阻断酶切。

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Optimizing Restriction Endonuclease Reactions
    2. Restriction Digest Protocol
    3. Double Digest Protocol with Standard Restriction Enzymes

  • 使用指南

    • Activity at 37°C for Restriction Enzymes with Alternate Incubation Temperatures
    • Activity of Restriction Enzymes in PCR Buffers
    • Cleavage Close to the End of DNA Fragments
    • Dam and Dcm Methylases of E. coli
    • Digestion of Agarose-Embedded DNA: Info for Specific Enzymes
    • Double Digests
    • Effects of CpG Methylation on Restriction Enzyme Cleavage
    • Heat Inactivation
    • NEBuffer Activity/Performance Chart with Restriction Enzymes
    • Optimizing Restriction Endonuclease Reactions
    • Restriction Endonucleases – Survival in a Reaction
    • Restriction Enzyme Diluent Buffer Compatibility
    • Restriction Enzyme Tips
    • Single Letter Codes
    • Star Activity

工具 & 资源

  • 选择指南

    • Alphabetized List of Recognition Sequences
    • Cleavage of Supercoiled DNA
    • Compatible Cohesive Ends and Generation of New Restriction Sites
    • Dam-Dcm and CpG Methylation
    • Frequencies of Restriction Sites
    • Isoelectric Points (pI) for Restriction Enzymes
    • Isoschizomers
    • NEB Diluent and Buffer Table
    • Recleavable Blunt Ends
    • Time-Saver™ Qualified Enzymes
    • Why Choose Recombinant Enzymes?

  • Web 工具

    • Competitor Cross-Reference Tool
    • DNA Sequences and Maps Tool
    • Double Digest Finder
    • Enzyme Finder
    • NEBcutter™ v3.0
    • NEBioCalculator®
    • REBASE®

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Is NruI affected by methylation?
    2. What is the activity of NruI at 25°C?
    3. Do I have to set-up digests with Time-Saver™ qualified enzymes for 5-15 minutes? Can I digest longer?
    4. Can you tell me more about the switch from BSA to Recombinant Albumin (rAlbumin) in NEBuffers?

  • 问题解决指南

    • Restriction Enzyme Troubleshooting Guide

  • 实验技巧

    由于 NruI 酶切末端较难连接,所以不是连接实验的首选酶。然而,在连接实验中,降低连接酶缓冲液中的 ATP 浓度可以有所改善。我们的 T4 DNA 连接酶缓冲液含有 1 mM ATP,如果降至 0.25 mM,NruI 酶切末端更易连接。