SspI |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

本酶提供高保真版 SspI-HF®（NEB #R3132）。

高保真（HF®）限制性内切酶在 rCutSmart™ 缓冲液（10X）中具有 100% 活性；统一缓冲液意味着更加直接、简化的样品处理过程。HF 内切酶还会显著降低星号活性。所有 HF 内切酶均符合省时酶（Time-Saver™）标准，可在 5-15 分钟内酶切底物 DNA，也可实现过夜酶切，而且不会降解 DNA。HF 限制性内切酶在改造时将性能作为重要指标，可在更宽的条件下具有完全活性，最大限度地减少非特异性酶切产物，并且为实验设计提供灵活性。

产品来源

大肠杆菌菌株，携带有克隆自球衣菌属（Sphaerotilus）（ATCC 13925）的 SspI 基因。

产品类别:
Discontinued (<3 years)

  • 特性和用法

    单位定义

    一个单位是指在 50 µl 的总反应体系中，37℃ 条件下，1 小时内酶切 1 µg λ  DNA 所需的酶量。

    反应条件

    1X NEBuffer™ EcoRI/SspI
    Incubate at 37°C

    1X NEBuffer™ EcoRI/SspI
    100 mM Tris-HCl
    50 mM NaCl
    10 mM MgCl2
    0.025% Triton® X-100
    (pH 7.5 @ 25°C)

    在不同缓冲液中的活性

    NEBuffer™ r1.1: 50%
    NEBuffer™ r2.1: 100%
    NEBuffer™ r3.1: 50%
    rCutSmart™ Buffer: 50%

    稀释兼容性

    • 稀释液 C

    贮存溶液

    10 mM Tris-HCl
    250 mM NaCl
    1 mM DTT
    0.1 mM EDTA
    200 µg/ml BSA
    50% Glycerol
    0.15% Triton® X-100
    pH 7.4 @ 25°C

    热失活

    65°C for 20 minutes

    甲基化敏感性

    dam 甲基化: 不敏感
    dcm 甲基化: 不敏感
    CpG甲基化: 不敏感

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    • SspI-HF®
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    • Monarch® DNA 胶回收试剂盒
    • Monarch® PCR & DNA 纯化试剂盒（5 μg）

    单独销售的组分

    • NEBuffer™ 套装（EcoRI/SspI、DpnII）

  • 注意事项

    1. 对 CpG、dcm 或 dam 甲基化均不敏感。

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. Optimizing Restriction Endonuclease Reactions
    2. Restriction Digest Protocol
    3. Double Digest Protocol with Standard Restriction Enzymes

  • 使用指南

    • Activity at 37°C for Restriction Enzymes with Alternate Incubation Temperatures
    • Activity of Restriction Enzymes in PCR Buffers
    • Cleavage Close to the End of DNA Fragments
    • Digestion of Agarose-Embedded DNA: Info for Specific Enzymes
    • Double Digests
    • Heat Inactivation
    • Restriction Endonucleases – Survival in a Reaction
    • Restriction Enzyme Diluent Buffer Compatibility
    • Restriction Enzyme Tips
    • Single Letter Codes
    • Star Activity

工具 & 资源

  • 选择指南

    • Alphabetized List of Recognition Sequences
    • Cleavage of Supercoiled DNA
    • Compatible Cohesive Ends and Generation of New Restriction Sites
    • Dam-Dcm and CpG Methylation
    • Frequencies of Restriction Sites
    • Isoelectric Points (pI) for Restriction Enzymes
    • Isoschizomers
    • NEB Diluent and Buffer Table
    • Recleavable Blunt Ends
    • Time-Saver™ Qualified Enzymes

  • Web 工具

    • DNA Sequences and Maps Tool
    • Double Digest Finder
    • Enzyme Finder
    • NEBcutter™ v3.0
    • NEBioCalculator®
    • REBASE®

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. What is Star Activity and how can it be avoided?
    2. Do I have to set-up digests with Time-Saver™ qualified enzymes for 5-15 minutes? Can I digest longer?
    3. Is this enzyme sensitive to dam, dcm or mammalian CpG methylation?