产品信息

α-N-乙酰半乳糖胺酶是一种具有高度特异性的糖苷外切酶，催化水解糖蛋白上寡糖和 Nα-连接糖链上的 D-N-乙酰氨基半乳糖残基。

底物特异性：

产品来源

该酶克隆自脑膜脓毒性金黄杆菌（Chryseobacterium meningosepticum），并在 E. coli 中表达。

产品类别:

Exoglycosidases Products,

Proteome Analysis Products

应用:

Glycan Sequencing,

Recombinant Glycoprotein Expression,

Glycoprotein Analysis

• 产品组分信息

  本产品提供以下试剂或组分：

  NEB #	名称	组分货号	储存温度	数量	浓度
  P0734S     -20       α-N-Acetylgalactosaminidase P0734SVIAL -20 1 x 0.15 ml 20,000 units/ml   GlycoBuffer 1 B1727SVIAL -20 1 x 1 ml 10 X   Recombinant Albumin (Low-glycerol) B9203SVIAL -20 1 x 0.25 ml 10 mg/ml

• 特性和用法

  单位定义

  1 单位指 10 µl 反应体系中，37℃ 条件下，1 小时内将 1 nmol (GalNAcα1-3)(Fucα1-2)Galβ1-4Glc-7-amino-4-methyl-coumarin（AMC）中超过 95% 的末端 α-D-N-乙酰半乳糖胺水解所需要的酶量。

  反应条件

  1X GlycoBuffer 1
  Supplement with 100 µg/ml Recombinant Albumin (Low-glycerol)
  Incubate at 37°C

  1X GlycoBuffer 1
  5 mM CaCl₂
  50 mM sodium acetate
  (pH 5.5 @ 25°C)

  贮存溶液

  20 mM Tris-HCl
  50 mM NaCl
  1 mM EDTA
  pH 7.5 @ 25°C

  热失活

  65°C for 10 minutes

  分子量

  实际: 47 kDa

  单位活性检测条件

  在 10 µl 1X GlycoBuffer 1（添加 100 µg/ml BSA）中，将两倍稀释的 α-N-乙酰半乳糖胺酶与 1 nmol AMC 标记底物进行温育。反应混合液在 37℃ 条件下温育 1 小时。通过薄层色谱法观察反应产物的分离情况（1）。

• 注意事项

  1. 对于特定底物，需对实验进行优化，以确定最佳温育时间和酶浓度。

• 参考文献

  1. Wong-Madden, S.T. and Landry, D. (1995). Glycobiology. 5, 19-28.

操作说明、说明书 & 用法

• 操作说明

  1. Typical Reaction Conditions α-N-Acetylgalactosaminidase (P0734)

• 使用指南

  • Glycobiology Unit Conversion Chart

FAQs & 问题解决指南

• FAQs

  1. How much exoglycosidase should be used?
  2. What is a good positive control for α-N-Acetylgalactosaminidase?
  3. Do detergents inhibit exoglycosidases/endoglycosidases?
  4. What are Glycosidases and their uses?
  5. Why have the NEB Glycosidase enzymes changed reaction buffers? What are the new reaction buffers and can I still use an enzyme with its old buffer? Where can I find the composition of the old buffers?
  6. How much exoglycosidase should be used?