5-alpha F’ Iq E. coli 感受态细胞（高效级） |NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品信息

E. coli 化学感受态细胞适用于多种应用中的高效转化。

重点

  • DH5α™ 衍生菌株
  • 无动物来源
  • 可高效转化 PCR、cDNA 或其它来源的非甲基化 DNA（hsdR）
  • 通过 laclq 严格控制表达，从而能够克隆潜在的毒性基因
  • 去除了非特异性核酸内切酶 I（endA1）的活性，以获得最高质量的质粒制备
  • 抗 T1 噬菌体（fhuA2）
  • 适用于蓝白斑筛选，通过 β-半乳糖苷酶基因的 α-互补实现
  • F’ 让细胞能够被噬菌体 M13 感染产生单链 DNA
  • 减少克隆 DNA 的重组（recA1）
  • K12 菌株

基因型

F´ proA+B+ lacIq ∆(lacZ)M15 zzf::Tn10 (TetR) / fhuA2∆(argF-lacZ)U169 phoA glnV44 Φ80Δ(lacZ)M15 gyrA96 recA1 relA1 endA1 thi-1 hsdR17

产品类别:
Cloning Competent Cell Strains Products

应用:
High-throughput cloning and automation solutions,
Transformation

  • 产品组分信息

    本产品提供以下试剂或组分：

    NEB # 名称 组分货号 储存温度 数量 浓度
    • C2992H     -80    
        SOC Outgrowth Medium B9020SVIAL 4 1 x 25 ml Not Applicable
        pUC19 Vector N3041AVIAL -20 1 x 0.025 ml 50 pg/µl
        NEB® 5-alpha F'Iq Competent E. coli (High Efficiency) C2992HVIAL -80 20 x 0.05 ml Not Applicable
    • C2992I     -80    
        SOC Outgrowth Medium B9020SVIAL 4 1 x 25 ml Not Applicable
        pUC19 Vector N3041AVIAL -20 1 x 0.025 ml 50 pg/µl
        NEB® 5-alpha F'Iq Competent E. coli (High Efficiency) C2992IVIAL -80 6 x 0.2 ml Not Applicable

  • 特性和用法

    Antibiotic for Plasmid Selection

    用于质粒筛选的抗生素 使用浓度
    Ampicillin 100 µg/ml
    Carbenicillin 100 µg/ml
    Chloramphenicol 33 µg/ml
    Kanamycin 30 µg/ml
    Streptomycin 25 µg/ml

    货运单

    • Ships on dry ice

    抗生素耐药性

    • 四环素

  • 优势和特性

    Features

    • 克隆毒性基因
    • 含 F´ 因子的菌株，具有极高的转化效率

    应用特性

    DNA 对转化效率和菌落产量的影响：

    5-alpha F’ Iq E. coli 感受态细胞（高效级） |

    在转化反应中使用的最佳 DNA 量比通常认为的要低。使用纯化后的超螺旋 pUC19，在 100 pg-1 ng 范围内转化效率最高。但是，随着 DNA 用量增加到 100 ng，单次转化反应得到菌落总数会随之增加。
    热激时间对 NEB 5-alpha F´Iq E.coli 感受态细胞转化效率的影响：

    5-alpha F’ Iq E. coli 感受态细胞（高效级） |

    按照所提供的高效级转化操作流程，用 100 pg pUC19 对照 DNA 转化 50 μl 感受态细胞，热激时间的变化范围为 0 至 80 秒。
    DNA 温育时间对 NEB 5-alpha F´Iq E. coli 感受态细胞转化效率的影响：

    5-alpha F’ Iq E. coli 感受态细胞（高效级） |

    按照所提供的高效级转化操作流程，用 100 pg pUC19 对照 DNA 转化 50 μl 感受态细胞，DNA 温育时间的变化范围为 0 至 40 分钟。
    细胞复苏培养基对转化效率的影响：

    5-alpha F’ Iq E. coli 感受态细胞（高效级） |

    按照所提供的高效级转化方案，用 100 pg pUC19 对照 DNA 转化 50 μl NEB 5-alpha F´Iq E.coli 感受态细胞，仅使用的复苏培养基不同。NEB SOC Outgrowth 培养基的转化效率最高。

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    单独销售的组分

    • SOC Outgrowth 培养基

  • 注意事项

    1. 注意：本产品含危险物质 DMSO。处理前请先查看 MSDS。
    2. 贮存和处理：感受态细胞应在 -80℃ 条件下贮存。-20℃ 条件下贮存会显著降低转化效率。当细胞温度高于 -80℃ 时，即使不融化，细胞也会失去效率。

操作说明、说明书 & 用法

  • 操作说明

    1. 5 Minute Transformation Protocol (C2992)
    2. High Efficiency Transformation Protocol (C2992)

  • 使用指南

    • Additional E. coli Strain Genotypes
    • Chemical Transformation Tips
    • Competent E. coli Genome Sequences Tool
    • Genetic Markers
    • McrA, McrBC and EcoKI Strain Phenotypes
    • Restriction of Foreign DNA by E. coli K-12

  • 应用实例

    • Enhancing Transformation Efficiency

工具 & 资源

  • 选择指南

    • Characteristics of Select E.coli Strains
    • Competent Cell Product Comparison
    • Competent Cell Selection Guide

  • Web 工具

    • Competitor Cross-Reference Tool
    • NEBcloner®

FAQs & 问题解决指南

  • FAQs

    1. Which competent cell strains are compatible with Gateway® Cloning?
    2. Does plasmid size affect transformation efficiency (C2992)?
    3. How long should I incubate cells on ice after DNA has been added (NEB #C2992H and NEB #C2992I)?
    4. How should I calculate the transformation efficiency (C2992)?
    5. What are the solutions/recipes (C2992)?
    6. What are the strain properties (C2992)?
    7. What is the difference between NEB #C2992H and NEB #C2992I?
    8. What is the optimal heat shock time for this strain (NEB #C2992H and NEB #C2992I)?
    9. Which strain of Competent E.coli should I use for general cloning?
    10. Can I store competent cells at -20°C instead of -80°C?
    11. Which kind of transformation tubes should be used?
    12. What volume of DNA can be added into competent cells?
    13. What is the shelf life for this strain (NEB #C2992H and NEB #C2992I)?
    14. Are NEB’s competent cells compatible with the “Mix & Go” protocol?
    15. How should I store SOC Outgrowth Medium? The SOC I received with my competent cells recommends storage at either room temperature or 4°C, however, when I purchase it as a stand alone product, it recommends storing it at 4°C. Which is better?
    16. How should fragments be prepared for assembly using NEBuilder HiFi?