PA Tag 新型标签系统 PA Tag

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PA tagPA Tag 新型标签系统                              PA Tag

亲和纯化标签蛋白!

  PA tag 系统是利用高亲和性&高特异性单抗(NE-1)识别肽标签(GVAMPGAEDDVV)的重组蛋白新型检测系统。PA tag 系统中的抗体琼脂糖可通过免疫沉淀法纯化 PA tag 融合蛋白,并可在洗涤后获得再生。中性 pH 条件下 PA tag 肽简单方便地竞争性洗脱 PA tag 融合蛋白。

  PA tag 系统的亲和性和特异性优于现有标签系统,抗体琼脂糖可再生 60 次,极大地降低成本,可用于免疫细胞化学、免疫印迹和流式细胞术,是动物宿主细胞重组蛋白生产的有效工具。

原理

PA Tag 新型标签系统                              PA Tag

载体列表


产品名称(载体名称)

抗性

规格

产品编号

大肠杆菌抗性

真核细胞抗性

pCAG-Ble PA tag-C

Bleomycin

20 μg

161-26861

pCAG-Ble PA tag-N Signal Plus

20 μg

168-26871

pCAG-Bsd PA tag-C

Blasticidin S

20 μg

165-26881

pCAG-Bsd PA tag-N Signal Plus

20 μg

162-26891

pCAG-Hyg PA tag-C

Hygromycin B

20 μg

165-26901

pCAG-Hyg PA tag-N Signal Plus

20 μg

162-26911

pCAG-Neo PA tag-C

Kanamycin

G418

20 μg

169-26921

pCAG-Neo PA tag-N Signal Plus

20 μg

166-26931

优点、特色


PA Tag 新型标签系统                              PA Tag

案例、应用


【使用例子:PA 标签抗体,大鼠单克隆抗体(NZ-1)】


  NZ-1 是特异性识别 PA tag(GVAMPGAEDDVV)的单克隆抗体,能用于检测动物细胞表达的 PA tag 融合蛋白,亲和性很高并能简单地用肽洗脱!已确认不存在交叉反应的物种包括小鼠、大鼠、仓鼠和犬类。

PA Tag 新型标签系统                              PA Tag


浓度:       标签表示(约1.0 mg/mL)

配方:       1× PBS(pH 7.5)水溶液

克隆号:    NZ-1

亚型:       IgG2a

应用:  免疫印迹 0.01 – 1 μg/mL  

                 免疫沉淀 10 – 50 μg/assay  

                 流式细胞术 0.1 – 10 μg/mL  

                 免疫细胞化学 0.1 – 10 μg/mL

保存条件:2–10°C 避免反复冻融


【NZ-1 Fab和PA肽的复合体结构分析】

PA Tag 新型标签系统                              PA Tag



标记抗PA tag抗体

PA tag-EGFP-6×His tag,重组,溶液



亲和标签比较

      亲和标签

     TARGET

             PA

       6 x His

       c-Mys

      HA

      GST

序列

(YPGQ)5V

GVAMPGAEDDVV

HHHHHH

EQKLISEEDL

YPYDVPDYA

残基数

21

12

6

10

9

218

分子量(kDa)

2.34

1.16

0.84

2.34

1.16

0.84

配位子

TARGET tag

PA tag

Ni, Co, Zn, Cu

c-Myc tag

HA tag

GST

抗体琼脂糖的

再利用

最高可再生循环利用40次

最高可再生循环利用60次

不可再生

不可再生

不可再生

不可再生

重组蛋白

纯化成本

+

+

+

++

++

+

单克隆抗体结合力(KD(M))(数字越小,亲和力越高)

1.0×10-8

4.9×10-10

Ni-NTA:

 1.0×10-5~6

2.2×10-9

2.8×10-9

Glutathione:

  1.0×10-5~6

亲和性

++++

+++++

+++

++++

++++

++++

和动物细胞外(培养基)的蛋白非特异性结合

+

+

+++++

+++

+++

++++

和动物细胞内蛋白的非特异性结合

+

+

++++

++++

+++

++++

肽洗脱

+++

+++

咪唑洗脱

++

++

谷胱甘肽洗脱

本比较表由富士胶片和光独立完成。样品、检测方法及手法不同有可能产生的特异性有变化,不能保证各种亲和标签的性能。

Target tag 系统和 Pa tag 系统同属Wako亲和标签系统,详情请联系经销商。        


 Wako新一代超亲和性的亲和标签系统“PA Tag System”http://labchem.fujifilm-wako.com.cn/resources/show/14.html


1. Fujii, Y. et al., "PA tag: A versatile protein tagging system using a super high affinity antibody against dodecapeptide

     derived from human podoplanin.", Protein Exp. Purif., 95, 240-247(2014).

2. Fujii, Y. et al. 新規アフィニティータグシステム“PAタグ”の利用法~蛋白質の精製および検出~蛋白質科学会アーカイブ, 7,e075

      (2014)

3. Kitago,Y et al.“ Structural basis for amyloidogenic peptide recognition by sorLA.”Nat Struct Mol Biol., 22(3):199-206(2015)


产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
161-26861 pCAG-Ble PA tag-C 
 pCAG-Ble PA 标签-C
20 μg for Genetic Research
168-26871 pCAG-Ble PA tag-N Signal Plus
 pCAG-Ble PA 标签-N 信号 增加型
20 μg for Genetic Research
165-26881 pCAG-Bsd PA tag-C
 pCAG-Bsd PA 标签-C
20 μg for Genetic Research
162-26891 pCAG-Bsd PA tag-N Signal Plus
 pCAG-Bsd PA 标签-N 信号 增加型
20 μg for Genetic Research
165-26901 pCAG-Hyg PA tag-C 
pCAG-Neo PA 标签-C
2 0μg for Genetic Research
162-26911 pCAG-Hyg PA tag-N Signal Plus
 pCAG-Hyg PA 标签-N 信号 增加型
20 μg for Genetic Research
169-26921 pCAG-Neo PA tag-C
 pCAG-Neo PA 标签-C
20 μg for Genetic Research
166-26931 pCAG-Neo PA tag-N Signal Plus
 pCAG-Neo PA 标签-N 信号 增加型
20 μg for Genetic Research