PUREfrex(R)2.0 重组无细胞蛋白质合成系统-价格-厂家-供应商-上海金畔生物科技有限公司

  • 详细信息
  • 询价记录
  • 相关实验
    • 货号:

      GFK-PF201-0.25-EX

    • 供应商:

      上海金畔生物科技有限公司

    • 数量:

      1

    • 英文名:

      PUREfrex(R)2.0

    • 保存条件:

      -70℃

    • 规格:

      1kit

    基于PURE system技术研发的重组蛋白体外表达试剂盒。试剂盒有蛋白,核糖体和dNTPs组成。蛋白用于转录,翻译和能量产生。只需添加DNA模板或则mRNA即可合成目的蛋白。Rnase和beta-半乳糖苷酶的污染减少,脂多糖也减少。所有试剂盒组分不带有标签,可以根据需要合成带有标签的融合蛋白,利于下一步的纯化。该试剂盒有还原剂DT,所以可用于胞内蛋白和不形成二硫键蛋白的合成。
     

    新开发的重组无细胞蛋白质合成系统PUREfrex(R)2.0 重组无细胞蛋白质合成系统-价格-厂家-供应商-上海金畔生物科技有限公司

    PUREfrex® 2.0

     

    ◆背景

     

    PUREfrex(R)2.0 重组无细胞蛋白质合成系统-价格-厂家-供应商-上海金畔生物科技有限公司

      PUREfre试剂盒是基于东京大学Takuya Ueda教授发明的PURE系统技术而新开发的一种重组无细胞蛋白质合成试剂。

       反应系统由蛋白质、核糖体、氨基酸和NTPs组成(参考文献1,2),其中,蛋白质具有转录、翻译和能量再生的功能。蛋白质与核糖体分别单独高度纯化后 组装成蛋白质合成系统,当合成蛋白质时,只需添加编码所需蛋白质的模板DNA或mRNA到反应混合液中并放置几个小时。重组系统只与组装、翻译相关因素有 关,并根据需要来调整反应混合物的成分,而不必考虑高背景对下游应用的影响。

       改进PUREfrex试剂盒组分纯化过程后,大大降低了RNA酶与β-半乳糖苷酶的污染。此外,每1L PUREfrex反应混合物消耗低于0.1EU的脂多糖(LPS)。PUREfrex试剂盒的所有蛋白组分没有用于纯化与检测的标记,允许使用任何标记与 蛋白质结合纯化产物。

     

     

    ◆应用

     

    用于制备以下蛋白质

    ● 原核蛋白

    ● 真核蛋白

    ● 膜蛋白

    ● 二硫键蛋白质

    ● 含有非天然氨基酸的蛋白质等

     

    蛋白质科学基础研究

    ● 翻译

    ● 蛋白质合成后折叠

     

    用于体外显示

    ● 核糖体展示技术

    ● mRNA展示技术

     

    ◆特点与优点

     

       PUREfrexTM试剂盒采用仅由翻译系统组成的PURE系统独创技术,此改进提高了试剂盒组分纯度。表1表示PUREfrexTM试剂盒与独创 PURE系统纯化方法的比较。每1L PUREfrexTM反应混合物消耗低于0.1EU脂多糖,并降低了核糖核酸酶与β-半乳糖苷酶的污染(图1)。

      此外,已经审查每个部件处于完好活性,PUREfrexTM试剂盒各部件没有用于纯化与检测的标记,允许任何标记与蛋白质结合。图2是用组氨酸标记的合成蛋白质纯化结果。

     

     

      PUREfrexTM 原始
    蛋白质    
    标记 组氨酸标记
    列数 3 1
    清洗剂清洗 +
    核糖体    
    清洗剂清洗 +
    转运RNA    
    清洗剂清洗 +

     

    Original*;The reaction mixture prepared according to Shimizu et al.(2005) Methods,vol.36,p.299

    表1 PUREfrexTM与独创PURE系统的组分纯化方法比较。

     

     

     

    PUREfrex(R)2.0 重组无细胞蛋白质合成系统-价格-厂家-供应商-上海金畔生物科技有限公司

    图1PUREfrexTM与原始PURE系统中反应混合物受污染情况的比较

     

     

    PUREfrex(R)2.0 重组无细胞蛋白质合成系统-价格-厂家-供应商-上海金畔生物科技有限公司

    测量并比较LPS含量及RNA酶与β-半乳糖苷酶活性,以此比较PUREfrexTM与独创PURE系统中反应混合物受污染的量。

    将独创PURE系统(参考文献2)的量与活性设置为100。与独创PURE系统中污染物含量相比,PUREfrexTM系统中污染物含量较低。

     

     

    PUREfrex(R)2.0 重组无细胞蛋白质合成系统-价格-厂家-供应商-上海金畔生物科技有限公司

    使用PUREfrexTM合成具有组氨酸标记的GFP(His标记),并用金属螯合树脂纯化。

    图2显示仅需一步即可完成高纯度纯化合成的His标记蛋白质。

     

     

    ◆活细胞研究的其他优点

     

    ● 无需遗传转化

    ● 无需考虑培养条件

    ● 无需考虑表达所需的诱导条件

    ● 无需考虑纯化条件

     

    PUREfrex 2.0 与DS 补充剂

     

    ● 升级为PUREfrex 2.0系列!

    ● 大大提高合成数量!

    ● 提供小包装、低价格的试用装 。

    ● 合成数量大大提高!(-10倍次数)

    ● 在保证PUREfrex特性的基础上改进了反应试剂成分(减少RNA酶、β-半乳糖苷酶和脂多糖(LPS)的污染),并提高合成效率。

    ● 用于250ul或5 * 250ul反应(版本1用于500ul反应)

     

     

    PUREfrex(R)2.0 重组无细胞蛋白质合成系统-价格-厂家-供应商-上海金畔生物科技有限公司

     

    PUREfrex(R)2.0 重组无细胞蛋白质合成系统-价格-厂家-供应商-上海金畔生物科技有限公司

     

    ◆试剂盒组成

     

    用于250ul反应

     

    试剂 容量 说明 保存
    试剂I (白色) 125 L 氨基酸,核苷酸,转运RNA和酶底物等。 -20°C
    试剂I (白色) 12.5 L 溶解在30%甘油缓冲液中的蛋白质 -20°C or -80°C*1
    试剂III (红色) 12.5 Lx2 核糖体(20μM) -80°C*1
    DHFRDNA(clear)*2
    Sequence (text)
    10 L 含有编码大肠杆菌DHFR基因的PCR产物(20ng / L)。 -20°C

     

     

    (1)   剩余的溶液应快速在液氮、干冰或乙醇中冻结,并储存于-80℃。如有必要,分装剩余溶液,并尽可能避免反复冻融。

    (2)   在合成DHFR的 50μL反应液中加入2.5μLDHFR DNA。

     

    PUREfrex(R)2.0 重组无细胞蛋白质合成系统-价格-厂家-供应商-上海金畔生物科技有限公司

     

     

    产品编号 产品名称 产品规格
    GFK-PF201-0.25-EX PUREfrex2.0 1KIT
    GFK-PF201-0.25-5-EX PUREfrex2.0 1KIT
    GFK-PF003-0.5-EX DnaK Mix 1KIT
    GFK-PF004-0.5-EX GroE Mix 1KIT
    GFK-PF005-0.5-EX DS supplement 1KIT
     
    温馨提示:不可用于临床治疗。

    风险提示:仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。