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货号： 316-04153、310-04151 供应商： 上海金畔生物科技有限公司-中国 英文名： ISOPLANT II 规格： 20次、100次 ISOPLANT II
DNA快速提取试剂(植物/酵母/細菌)
ISOPLANT II是可以迅速地从植物・酵母・细菌提取DNA的试剂盒。与旧产品ISOPLANT一样，
利用Solution II的主要成分氯化苄，对细胞壁进行破坏，在表面活性剂的作用下，使其溶解。植物
组织的多糖及多酚比植物组织多，提取时常混入DNA中。这些物质抑制限制 性内切酶反应及PCR，
难以对DNA进行定量测定。改良后的新产品ISOPLANT II，可有效去除多糖及多酚等抑制物质。不
仅可以从草本植物提取，还可以从难度较大的木本植物提取，提取到的DNA可用于PCR及限制性内切酶反应。◆特点
• 迅速地从植物・酵母・细菌提取基因组DNA
• 无需使用臼等工具捣碎材料，便于处理多个样品
• 经改良，可有效去除抑制物质（多糖及多酚）
◆产品列表
保存方法
冷蔵保存（2～10°C）
若长时间不使用RNase A ，请冷冻保存（-20°C）。除了RNase A ，其他产品可以室温保存。
ISOPLANT II （20回分、100回分）
产品
容量（20次）
容量（100次）
备注
Wash Buffer
20 ml x 1
100 ml x 1
Solution I
6 ml x 1
30 ml x 1
可能析出白色沉淀，但不影响品质。请进行37°C左右的水浴，待结晶完全溶解后即可放心使用。
Solution II
3 ml x 1
15 ml x 1
主要成分是氯化苄。氯化苄为危险品，请小心使用。
Solution III-A
2 ml x 1
10 ml x 1
Solution III-A为白色悬浊液，蒸发后只剩下白色固相，请使用灭菌蒸馏水溶解。
Solution III-B
2.5 ml x 1
12 ml x 1
TE（pH8.0）
2 ml x 1
10 ml x 1
10 mM Tris-HCl（pH8.0）, 1 mM EDTA
RNase A
（1 mg/ml）
20 µl x 1
100 µl x 1
若长时间不使用RNase A ，请冷冻保存（-20°C）。
◆使用实例
操作流程
植物
酵母、细菌
实验数据
1. 使用从植物叶子提取的DNA进行RAPD分析
2. 使用从植物叶子提取的DNA进行制限性内切酶反应
3. 从细菌、酶提取得DNA进行制限性内切酶反应
4. ISOPLANT II与旧产品（ISOPLANT）的纯度比较
Data 1: 使用从植物叶子提取的DNA进行RAPD分析
分别使用各样品0.1g冻结粉碎的叶子的1/100提取到的DNA，进行RAPD分析。
RAPD-PC
PCR Mixture
PCR条件
Template DNA
1 µl
95°C
3 min.
1 cycle
10×Gene Taq Universal Buffer
5 µl
40°C
5 min.
dNTP Mixture (2.5 mM each)
4 µl
72°C
1 min.
Arbitrary Primer(AP-A-2 primer) (10 µM)
1 µl
Gene Taq (5 units/µl)
0.25 µl
95°C
15 sec.
25 cycles
H2O
38.75 µl
40°C
2 min.
Total Volume
50 µl
72°C
1 min.
72°C
5 min.
结果
lane 1. 西瓜
lane 2. 黄瓜
lane 3. 南瓜
lane 4. 玉米
lane 5. 水稻
lane 6. 葱
lane 7. 豆子
lane 8. 烟草
lane 9. 菠菜
lane 10. 银杏
lane 11. 苹果
lane 12. 牡蛎
lane 13. 桃
lane 14. 柚子
lane 15. 梅干
lane 16. 梨
M : Marker 4 (φX174/Hae III)
Arbitrary Primer: AP-A-2(TGGATTGGTC)
Taq DNA polymerase: Gene Taq
3% Agarose 21
Data 2: 使用从植物叶子提取的DNA进行制限性内切酶反应
分别使用各样品0.1g冻结粉碎的叶子的1/20提取到的DNA，进行制限性内切酶反应(5～20 units)。
lane 1. 烟草
lane 2. 菠菜
lane 3. 胡萝卜
lane 4. 梨
lane 5. 水稻
lane 6. 茶
lane 7. 柚子
lane 8. 苹果
M : Marker 2 (λ/Hind III・EcoR I) a : intact DNA
b : Hind III digest + RNase A
0.8% Agarose S
•注意事项 提取DNA时进行NaBH4处理，获得上述数据。
Data 3: 从细菌、酵母提取的DNA进行制限性内切酶反应
分别取1/20从1.5ml培养液体提取到的DNA，进行制限性内切酶反应(5～20 units)。
lane 1. 粘质沙雷氏菌 Serratia marcescens
lane 2. 牛莫拉氏杆菌 Moraxella bovis
lane 3. 流感嗜血杆菌C Haemophilus influenzae c
lane 4. 普通变形杆菌 Proteus vulgaris
lane 5. 裂殖酵母 Shizosaccharomyces pombe
lane 6. 毕赤酵母 Pichia pastoris
lane 7. 酿酒酵母 Sacaomyces cerevisiae
M : Marker 2 (λ/Hind III・EcoR I)
a : intact DNA
b : Hind III digest + RNase A0.8% Agarose S
Data 4: ISOPLANT II与旧产品（ISOPLANT）的纯度比较
使用相同的样本量，分别用ISOPLANT II及旧产品（ISOPLANT）从菠菜及苹果叶子提取DNA，
检测吸光度（200～300 nm）菠菜
苹果
使用ISOPLANT II提取DNA，在260nm有峰值。表明DNA不含多糖及多酚等夹杂物，纯度较高。
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