mESF基础培养基/mESF添加物

用于小鼠ES细胞培养的无血清培养基

 

　　本产品是用于小鼠ES细胞培养的无血清培养基。只需在基础培养基中添加mESF添加物和LIF后即可进行小鼠ES细胞培养。使用时无需添加FBS或血清代替品，同时无需使用饲养层细胞。

 

 

◆产品

　　●　mESF基础培养基（编号No. 136-17805）

　　●　mESF添加物（编号No. 299-73301）

　　　　mESF Supplement A 5ml×1
　　　　mESF Supplement B 5ml×1（含有0.0078% 2-mercaptoethanol）

 

◆特点

　　●　无需FBS和血清代替品（无血清培养基）

　　●　无需饲养层细胞

　　●　低浓度LIF下也能维持未分化能力

 

◆使用方法

　　●　往mESF基础培养基全量加入各种mESF Supplement及LIF。

※注　直接将mESF从现在使用中的培养基移出时，成功移植细胞数量有可能性减少。因此，请播种比移植时更多的细胞。此外，若不擅长直接移植，请按照以下顺序进行驯化。

　　①播种细胞时，将使用中的培养基与mESF培养基以1:1的比例混合。

　　②在后面的移植阶段，将使用中的培养基与mESF培养基以1:3、 1:7的比例混合，依次增加mESF培养基的用量。

 

◆小鼠ES细胞D3细胞系的培养

　　使用本产品培养小鼠ES细胞D3细胞系传代至第5代，观察到细胞形态、细胞繁殖能力、未分化标记物。

 

◆细胞形态

 

　　观察到具有小鼠ES细胞特有光泽的细胞集落。

 

 

 

 

 

 

◆细胞繁殖曲线

 

　　使用本产品后的繁殖曲线如下图。

 

（培养基组成）
　　ｍESF基础培养基 + 各mESF Supplement + 1,000units/ml StemSure® LIF

（细胞播种数）

　　7,000cells/well　

（使用骨胶原蛋白涂层处理12孔板）　

 

 

◆观察到未分化标记物

　　各种未分化标记物（Nanog, Sox2, Oct3/4, SSEA-1）呈阳性。

 

 

 

 

 ◆低浓度LIF下的小鼠ES细胞D3细胞系培养

 

　　在低浓度LIF下（250, 500units/ml）培养了小鼠ES细胞D3细胞系。

 

◆集落形态（ALP染色）・细胞繁殖曲线

　　细胞形态及细胞繁殖曲线如下图。 

 

 

（培养基组成）

　　ｍESF基础培养基 + 各mESF Supplement + 250 or 500 or 1,000units/ml StemSure® LIF

（细胞播种数）

　　7,000cells/well　

（使用骨胶原蛋白涂层处理12孔板）　

 

 

◆ALP染色阳性集落形成率

　　任何LIF浓度下的集落ALP染色几乎都呈阳性。