ES细胞・iPS细胞培养用血清代替物-WAKO和光纯药

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  • 货号: 197-16775
    供应商: 上海金畔生物科技有限公司
    数量: 1
    英文名: StemSure® Serum Replacement
    保存条件: -20℃
    规格: 500ml
    ES细胞・iPS细胞培养用血清代替物
     
      本产品是ES细胞和iPS细胞培养中使用的血清代替品。血清含有分化诱导因子,会导致干细胞分化。使用本产品代替血清,可在ES和iPS细胞培养的同时,保持他们的未分化状态,达到稳定培养。
      本产品不含剧毒物质,将其作为普通物质处理。
      使用本产品配制培养基培养的小鼠ES细胞,可用于制备嵌合体小鼠,并确认其种系传递.
     
     
    ◆特点
     
      ●可用于嵌合体小鼠制备,并确认其种系传递
      ●作为血清替代品,用于小鼠ES细胞・人IPS细胞培养。
      ●不含剧毒物质
     
     
    ◆实验项目
     
      ●克隆形成实验(使用小鼠ES细胞D3)
      ●碱性磷酸酶检验实验(使用小鼠ES细胞D3)
      ●无菌实验
      ●pH
      ●渗透压
      ●内毒素
      ●支原体实验
     
     
    ◆嵌合体小鼠的制备与种系传递 Update!!
     
      将组装HaloTag® cDNA的目标载体导入小鼠ES细胞,用含有StemSure®  Serum Replacement(SSR)的培养基培养。确认载体导入小鼠ES细胞后,将其注入至ICR小鼠的胚盘胞,并移植至ICR小鼠的子宫。得到的嵌合体小鼠与C57BL/6J小鼠交配,获得F1小鼠。
     
     
    ◆《嵌合体小鼠》
     
      收集嵌合体小鼠的血液,用TRITC(四甲基若丹明异硫氰酸盐)对HaloTag® 蛋白质染色。发现小鼠ES细胞源的HaloTag® 的血液被染色,可确认为嵌合化。
     
    ES细胞・iPS细胞培养用血清代替物-WAKO和光纯药ES细胞・iPS细胞培养用血清代替物-WAKO和光纯药
     
    ◆《 F1小鼠》
     
      F1小鼠的血液发现HaloTag® 存在,可确认用SSR培养基培养的ES细胞嵌合小鼠能够正常存活
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    <数据提供  筑波大学生命科学动物资源中心三輪佳宏老师>
    HaloTag® 为Promega公司的注册商标。
     
     
    ◆人iPS细胞201B7的培养
    《克隆形态与ALP染色》
     
    已确认可用StemSure®Serum Replacement(SSR)培养人iPS细胞201B7株。ALP染色呈阳性。
     
     ES细胞・iPS细胞培养用血清代替物-WAKO和光纯药
     
    <培养基组成>
     D-MEM/Ham’s F-12 + 20% SSR + 2mmol/l L-Glutamine +1×MEM Non-essential Amino Acids + 0.1mmol/l StemSure® 2-Mercaptoethanol + 1×Penicillin-Streptomycin + 5ng/ml bFGF
     
     
    ◆《未分化标记的发现》
     
      使用StemSure®Serum Replacement(SSR)培养的人iPS细胞201B7株,确认各种未分化标记(Sox2, Oct3/4, SSEA-3, SSEA-4, Tra-1-81)呈阳性。
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    ◆小鼠ES细胞D3的培养
     
    《细胞形态与ALP染色》
      
      使用StemSure®Serum Replacement(SSR)培养小鼠ES细胞D3,能观察到小鼠ES细胞群特有的光泽,ALP染色呈阳性。
     ES细胞・iPS细胞培养用血清代替物-WAKO和光纯药
     
    《细胞增殖曲线》
      用不同培养基培养小鼠ES细胞D3进行14继代培养,比较细胞增殖。
      如下图所示StemSure® 系列与A公司有同等的性能。
     ES细胞・iPS细胞培养用血清代替物-WAKO和光纯药
    <StemSure® 系列培养基组成>
     StemSure® D-MEM + 15% SSR + 2mmol/l L-Glutamine + 1×MEM Non-essentialAmino Acids + 0.1mmol/lStemSure® 2-Mercaptoethanol + 1×Penicillin-Streptomycin + 1,000units/ml StemSure® LIF
     (使用胶原包被的12孔板)
     
    细胞群倍加数*
      使用不同培养基对小鼠ES细胞D3进行继代培养,检查培养天数与细胞群倍加数的关系。
      下图显示StemSure® 系列与A公司产品(含血清)的细胞群倍加数相同。
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    *细胞群倍加数 cell population doubling level,缩写PDL,指从培养开始至现在细胞群的倍增次数。
     
    <培养基组成>
     StemSure® D-MEM + 15% SSR + 2mmol/l L-Glutamine + 1×MEM Non-essentialAmino Acids + 0.1mmol/l StemSure® 2-Mercaptoethanol + 1×Penicillin-Streptomycin + 1,000units/ml StemSure® LIF
     (使用胶原包被的12孔板)
     
     
    《未分化标记的检测》
      使用StemSure® 系列对小鼠ES细胞D3进行5代继代培养,各种未分化标记(Nanog, Oct3/4, Sox2, SSEA-1)呈阳性。
     ES细胞・iPS细胞培养用血清代替物-WAKO和光纯药
    <培养基组成>
     StemSure® D-MEM + 15% SSR + 2mmol/l L-Glutamine + 1×MEM Non-essential Amino Acids + 0.1mmol/l StemSure® 2-Mercaptoethanol+ 1×Penicillin-Streptomycin + 1,000units/ml StemSure® LIF
     
    《畸形瘤的形成》
      用StemSure® 系列对小鼠ES细胞D3进行继代培养。对免疫不全小鼠的皮下注射培养后细胞。在形成皮下畸形瘤,其内部检测出神经组织(外胚叶源)、软骨组织(中胚叶源)、管腔结构纤毛上皮(内胚叶源)。
     ES细胞・iPS细胞培养用血清代替物-WAKO和光纯药
    <培养基組成>
     StemSure® D-MEM + 15% SSR + 2mmol/l L-Glutamine + 1×MEM Non-essential Amino Acids + 0.1mmol/l StemSure® 2-Mercaptoethanol+ 1×Penicillin-Streptomycin + 1,000units/ml StemSure® LIF
     
     

    产品编号 产品名称 产品规格 产品等级
    197-16775  StemSure® Serum Replacement 500ml 细胞培养用
    197-16275 StemSure® D-MEM(High Glucose)with Phenol  500ml 细胞培养用
    198-15781 StemSure® 10mmol/l 2-Mercaptoethanol Solution  100ml 细胞培养用
    195-15791 StemSure® 50mmol/l Monothioglycerol Solution  100ml 细胞培养用
    190-15805 StemSure® 0.1w/v% Gelatin Solution 500ml 细胞培养用
    199-16051 StemSure® LIF, Mouse, recombinant, Solution 106units 细胞培养用
    195-16053 StemSure® LIF, Mouse, recombinant, Solution 106units 细胞培养用
    195-16031 StemSure® Freezing Medium 100ml 細胞培養用

     

    温馨提示:不可用于临床治疗。

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