组织培养用胶原蛋白

组织培养用胶原蛋白
Cellmatrix®Series

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

组织培养用胶原蛋白组织培养用胶原蛋白

Cellmatrix® Series

  Cellmatrix是作为组织培养胶原蛋白开发的。可简单再现各种需要使用胶原蛋白的培养方法。


优势、特色


Cellmatrix® Type I-A


 猪腱由来,酸可溶性的Type-I胶原蛋白

 浓度3.0mg/ml、pH3的无菌溶液

 高凝胶强度,最适合胶原蛋白・凝胶包埋培养

● 凝胶的透明度高,容易显微镜观察

Cellmatrix® Type I-C


 猪皮由来的胃蛋白酶可溶化的Type-I胶原蛋白

 浓度3.0mg/ml、 pH3的无菌溶液

 低粘度,最适合包被

 几乎不会凝胶化

Cellmatrix® Type I-P


 猪腱由来的胃蛋白酶可溶化的Type-I胶原蛋白

 浓度3.0mg/ml、pH3的无菌溶液

 粘性低、容易处理

 形成凝胶

Cellmatrix® Type Ⅲ


 用胃蛋白酶处理猪皮精制的Type-Ⅲ胶原蛋白

 浓度3.0mg/ml、pH3的无菌溶液

 最适合包被

● 几乎不会凝胶化

Cellmatrix® Type Ⅳ


 用胃蛋白酶处理牛晶状体前囊精制的Type-Ⅳ胶原蛋白

 低粘度、最适合包被

 浓度3.0mg/ml、pH3的无菌溶液

 不会凝胶化

应用


【Type I-A】

  经胶原蛋白、凝胶包埋培养的小鼠乳腺癌细胞增殖形态

  Cellmatrix Type I-A具有高凝胶强度

组织培养用胶原蛋白

【Type I-P】

  Cellmatrix Type I-P可形成比较软的凝胶

组织培养用胶原蛋白


【Type I-C】

  培养细胞的伸展活性

组织培养用胶原蛋白     组织培养用胶原蛋白

 未涂布        涂布胶原蛋白



【相关资料】


组织培养用胶原蛋白


Nitta-Gelatin Product Guide_en

胶原蛋白凝胶培养方法


事前准备


组织培养用胶原蛋白

胶原蛋白凝胶上培养

组织培养用胶原蛋白

胶原蛋白凝胶包埋培养

组织培养用胶原蛋白

胶原蛋白涂层法

组织培养用胶原蛋白



Q:    请告知明胶蛋白和明胶的差异。为什么明胶在4℃做凝胶,胶原蛋白在37℃做凝胶?

A:    明胶是胶原蛋白的变性产物,具体地说,胶原蛋白是三股螺旋缠绕的结构,分子量为30万道尔顿,经热等因

          素而被破坏,形成无规则线圈结构的蛋白质为明胶。

          所以明胶和胶原蛋白,一级结构(氨基酸组成)相同,二级结构不同。这个差异反映了胶原蛋白和明胶产生

          凝胶的条件差异。

          胶原蛋白保持三股螺旋缠绕的结构,在螺旋结构外侧排列着疏水性氨基酸——脯氨酸。胶原蛋白凝胶利用这

          个疏水性氨基酸,通过<温度高的一方,具有高结合力>疏水结合,制备明胶。

          而明胶二级结构被破坏,亲水性氨基酸在外侧排列,通过氢结合和离子结合制作凝胶。

          当温度高时,<氢结合力+离子结合力>克服明胶主链的热运动,不形成凝胶。但是,当变为低温时,<氢结合

          力+离子结合力>成为热运动力量,明胶形成凝胶。

  

 

Q:    用明胶凝胶是否能培养?

A:    用明胶凝胶不能培养。明胶凝胶在37℃的培养条件下不会形成凝胶,将会溶化。

          在组织培养液中,明胶的用途一般为:在培养皿中进行明胶涂层培养,或在明胶海绵上用福尔马林等进行桥

          联培养。

  

 

Q:    想购买胶原蛋白凝胶,是否有?

A:    以胶原蛋白溶液的状态作为商品销售。可根据附送的手册,进行胶原蛋白凝胶制作。

          请将Cellmatrix Type I-A作为胶原蛋白凝胶培养产品,进行订购。为第一次做胶原蛋白凝胶培养法的顾客,

          准备了制作凝胶所必须的试剂套装和胶原蛋白凝胶培养试剂盒。

  

 

Q:    为什么溶解于酸性溶液的胶原蛋白能进行培养?

A:    实际上,在胶原蛋白包埋细胞前,需要将酸性的胶原蛋白溶液调整成中性。

          调整后的胶原蛋白因为低温保持者溶液状态,以这个状态将细胞悬液混合到胶原蛋白溶液中。

          之后,将含有这个细胞的胶原蛋白溶液移到培养皿中,在37℃中加热,胶原蛋白以细胞包埋状态形成凝胶。

          这个就是胶原蛋白凝胶包埋培养法的制作方法。

          详细请参考在线手册。

  

 

Q:    Cellmatrix有很多的胶原蛋白种类,应该选哪个才好?

A:    根据目的不同,变化使用的种类。

          根据主要目的,将产品系列分成如下种类,请参考。

          胶原蛋白凝胶培养试剂盒、Cellmatrix Typr I-A、Cellmatrix TypeI-P适合胶原蛋白凝胶培养法。

          其他的Cellmatrix(Cellmatrix Type I-C,III,IV)不能进行胶原蛋白凝胶培养。

          Cellmatrix Type I-C适合标准的涂层培养法——胶原蛋白涂层培养法。请根据客人实验的细胞及方法,考虑

          最适合的Cellmatrix ,实验性地考虑其他类型的胶原蛋白。例如,软骨细胞使用Cellmatrix Type II等,表皮

          细胞使用Cellmatrix Type IV等。

 

  

Q:    为何胶原蛋白凝胶比琼脂凝胶的培养效率好?

A:    请让我简单地说明琼脂培养法和胶原蛋白凝胶培养法的差异。

          被包埋在胶原蛋白凝胶内的细胞,在胶原蛋白基质上以贴壁的状态进行增殖。         .

          可是,被琼脂包埋的细胞,在琼脂基质上以未贴壁状态进行增殖。所以,贴壁依赖性细胞在胶原蛋白凝胶中

          进行细胞增殖,在琼脂内不进行细胞增殖。

          有报告指出:贴壁依赖性比较低的癌细胞,采用胶原蛋白凝胶培养法比采用琼脂培养法,显示高倍数的克隆

          形成率。

          有众多报告指出:胶原蛋白凝胶法对细胞增殖、细胞分化的诱导、形态形成等有效。

          关于胶原蛋白凝胶培养法的详细报告,请参考主页的论文介绍。

 

 

Q:    胶原蛋白凝胶包埋培养法和胶原蛋白、涂层培养法,有什么不同?

A:    胶原蛋白凝胶包埋培养法是在胶原蛋白凝胶内做细胞包埋,进行细胞培养的方法。

          被包埋到胶原蛋白内的细胞,和体内一样进行三维增殖。

          胶原蛋白涂层培养法是在培养皿上做胶原蛋白薄涂层,然后再上面进行细胞培养的方法,细胞呈单层增殖。

          综上所述,胶原蛋白凝胶包埋培养法是作为细胞外基质,利用胶原蛋白的三维培养法:胶原蛋白涂层培养法

          是利用胶原蛋白作为细胞吸附因子的二维培养法(单层培养法)。

 

  

Q:    想进行胶原蛋白凝胶培养发,应该选哪种Cellmatrix才好?

A:    请选Cellmatrix Type I-A。还有为初学者准备的,含有制作胶原蛋白凝胶全部试剂的胶原蛋白凝胶培养试剂

          盒。

          建议第一次使用的人购买这个胶原蛋白凝胶培养试剂盒。

 

 

Q:    想进行胶原蛋白、涂层培养防法,应该选哪种Cellmatrix才好?

A:    请选Cellmatrix Type I-C。Cellmatrix Type I-C具有低粘度,处理容易,最适合标准胶原蛋白涂层培养法。

          根据细胞种类和培养条件的不同,也能得到更好的适合细胞的胶原蛋白涂层。

          例如,表面细胞可使用Cellmatrix Type IV胶原蛋白等。请进行实验研讨。

  

 

Q:    想学习胶原蛋白培养法,请介绍合适的论文。

A:    详细请参考在线手册。

          该手册详细地介绍了:所谓的胶原蛋白是什么、胶原蛋白培养法的效果、胶原蛋白培养发的具体方法等。

          关于论文,请参考主页的论文介绍项目。

  

 

Q:    请具体地告知胶原蛋白、凝胶包埋培养方法。

A:    将作为酸性溶液的胶原蛋白溶液Cellmatrix Type I-A调整成中性。

          调整后的胶原蛋白因为低温,保持着溶液状态,以这个状态将细胞悬浊液混合到胶原蛋白溶液中。之后江汉

          油田这个细胞的胶原蛋白溶液移到培养皿中,在37℃中加热,胶原蛋白以细胞包埋状态形成凝胶。

          关于详细 ,请参考在线手册。

 

 

Q:    请具体地告知胶原蛋白涂层的方法。

A:    将Cellmatrix Type I-C用稀盐酸(pH3.0,约10-3M)稀释10倍以上,放入培养皿中,在室温中静置

          30~60分钟。

          静置后,摄取胶原蛋白溶液,以常温、无菌状态干燥培养皿。干燥后,用PBS或培养液洗涤2次,加入细胞悬

          液,进行普通培养。

  

 

Q:    进行胶原蛋白涂层时,向培养皿注入多少量的胶原蛋白溶液才好?

A:    胶原蛋白溶液注入量为均匀覆盖培养皿底面即可。

          以1ml/10cm2比例为标准

 


Q:    Cellmatrix Type IV是否能进行包埋培养?

A:    单独使用Cellmatrix Type IV胶原蛋白不能进行包埋培养。众多胶原蛋白中只有I型胶原蛋白具有凝胶化能力。

          若想研究在包埋培养下的IV型胶原蛋白与细胞的互相作用,请混合I型胶原蛋白IV型胶原蛋白。Cellmatrix 

          Type I和Cellmatrix Type IV的混合比例,在1:2~2:1范围为好。

          混合比例与胶原蛋白凝胶强度的关系,请参考本公司手册<使用胶原蛋白的细胞培养法>。

  

 

Q:    所谓的胶原蛋白是不是培养基?

A:    胶原蛋白不是培养基。所谓的胶原蛋白是培养基的基质。

          胶原蛋白凝胶是在培养基中作为整体结构支撑体的胶原蛋白组织,相当于生物体中的血液。

          在体外的细胞作为胶原蛋白的细胞外基质存在。

          将胶原蛋白作为培养基质使用的胶原蛋白凝胶包埋培养,旨在重现生物内环境的状态。

  

 

Q:    请告知胶原蛋白的稀释方法。

A:    用pH3.0稀盐酸稀释。因为胶原蛋白具有高粘性,使用像试管一样的细小容器比较难稀释,使用三角烧瓶或离

          心管(例如:50mL培养用塑料离心管等)等粗的容器比较容易稀释。

          三角烧瓶,像画圆一样摇晃10次左右:离心管,来回颠倒10次左右,进行搅拌稀释。如果,出现起泡,可静

          置一晚后使用,或以低速离心分离(1500rpm,3min)脱气后使用。

          同时,开发了胶原蛋白、涂层培养用低粘度型的Cellmatrix Type I-C。可一起讨论。

  

 

Q:    pH3.0盐酸是多少摩尔值?请告知制作方法。

A:    pH盐酸是10-3摩尔/升。因为盐酸是强酸,浓度基本合适,调整好pH仪表,早可快递、正确地制作。

          例如,一边用pH仪表测量,一边用巴斯德移液管一滴一滴向100mL蒸馏水中加入1N的盐酸。

          pH3.0盐酸制成后,请以高压灭菌或过滤灭菌。

 

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 产品价格
631-00651 Cellmatrix Type I -A 20ml 培养用
637-00653 Cellmatrix Type I -A 100ml 培养用
638-00661 Cellmatrix Type I -P 20ml 培养用
634-00663 Cellmatrix Type I -P 100ml 培养用
631-00771 Cellmatrix Type I -C 20ml 培养用
637-00773 Cellmatrix Type I -C 100ml 培养用
631-01011 Cellmatrix Type III 5ml 培养用
637-01013 Cellmatrix Type III 20ml 培养用
635-01014 Cellmatrix Type III 100ml 培养用
638-05921 Cellmatrix TypeIV 5ml 培养用
634-05923 Cellmatrix TypeIV 20ml 培养用
632-05924 Cellmatrix TypeIV 100ml 培养用