硅胶珠型microRNA分离试剂盒

硅胶珠型microRNA分离试剂盒

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硅胶珠型microRNA分离试剂盒硅胶珠型microRNA分离试剂盒

FUJIFILM Wako提供能使从Ago 免疫沉淀到RNA 提取等一系列实验操作简化的“microRNA Isolation Kit”系列。使用本系列试剂盒能简便地从人和小鼠的细胞或组织中提取Ago蛋白结合的microRNA以及靶mRNA,还能从培养上清、血清、血浆中提取游离Ago蛋白结合的microRNA。所提取到的RNA可以应用于qPCR、微阵列检测、NGS等下游实验。本系列包括采用磁珠的MagCapture™ microRNA Isolation Kit,以及采用了硅胶珠法的microRNA Isolation Kit。


硅胶珠型microRNA分离试剂盒

microRNA Isolation Kit抗Ago抗体固定珠子具有非特异吸附性低的特征,它采用二氧化硅基聚合物珠粒,以离心为基础进行免疫沉淀操作。在从免疫沉淀后的硅胶珠中提取RNA的步骤时,采用苯酚/氯仿提取(P/C法)及乙醇沉淀来提取RNA。FUJIFILM Wako推出含有固定了抗Ago1抗体(2A7)、抗人Ago2抗体(4G8)、抗小鼠Ago2抗体(2D4)、抗人Ago3抗体(1C12)的硅胶珠的4种试剂盒。

 

◆试剂盒组成(以Human Ago2为例,10次用)


1. Anti-Human Ago2 Antibody Beads Solution:500 μL×1瓶

2. Cell Lysis Solution:50 mL×1瓶

3. Elution Solution:500 μL×1瓶

4. Ethachinmate:30 μL×1瓶

5. 3 mol/L Sodium Acetate:400 μL×1瓶




◆操作示意图


硅胶珠型microRNA分离试剂盒

◆试剂盒使用实例


用microRNA Isolation Kit, Human Ago2通过Urea-PAGE分离从三种5×106 cells的人培养细胞株(HeLa、HepG2、HEK293),和小鼠培养细胞株(P388D1)中提取的microRNA组分,再进行银染(311-03961、CLEAR STAINAg、20 tests)检测。结果表明能从人培养细胞中特异性提取microRNA(图1)。以同样的银染试剂,检测用microRNA Isolation Kit, Mouse Ago2从5×106 cells的人培养细胞(HeLa)和啮齿动物培养细胞株(P388D1、CHO、PC-12)中提取的microRNA组分。结果表明,能从三种啮齿动物培养细胞株中特异性提取microRNA而不能从人细胞株中提取(图2)。

硅胶珠型microRNA分离试剂盒

图1.通过用Human Ago2提取的microRNA的进行银染检测

硅胶珠型microRNA分离试剂盒

图2. 对Mouse Ago2提取的microRNA的进行银染检测

产品编号 产品名称 使用抗体克隆号

对应

物种

对应样本 提取RNA IP   B/F
分离法
RNA提取法
291-70201 microRNA Isolation Kit, Human/Mouse Ago1
microRNA纯化试剂盒,人/鼠Ago1  
2A7 人、小鼠 细胞/组织 microRNA
靶标mRNA
   
离心 P/C 法
(苯酚/氯仿法)
   
292-66701

microRNA Isolation Kit, Human Ago2

microRNA纯化试剂盒,人Ago2

4G8 人、猴、狗
292-67301 microRNA Isolation Kit, Mouse Ago2
    microRNA纯化试剂盒,小鼠Ago2
2D4 小鼠、
大鼠
297-70301 microRNA Isolation Kit, Human Ago3
microRNA纯化试剂盒,人Ago3
1C12

产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 产品价格
291-70201 microRNA Isolation Kit, Human/Mouse Ago1 
 microRNA纯化试剂盒,人/鼠Ago1
10 tests for Genetic Research
292-66701 microRNA Isolation Kit, Human Ago2 
 microRNA纯化试剂盒,人Ago2 
10 tests for Genetic Research
292-67301 microRNA Isolation Kit, Mouse Ago2 
 microRNA纯化试剂盒,小鼠Ago2 
10 tests for Genetic Research
297-70301 microRNA Isolation Kit, Human Ago3 
 microRNA纯化试剂盒,人Ago3
10 tests for Genetic Research